Оценка антиоксидантной и противовоспалительной активности эфирного масла куркумы длинной (турмерика) Curcuma longa L.

Целью исследования было исследовать химический состав и уровень антиоксидантной активности эфирного масла куркумы длинной Curcumalonga L. при воспалении.

Введение
Эфирные масла, присутствующие в растениях, в основном состоят из терпеноидов с низким молекулярным весом. Это позволяет им легко проходить через клеточные мембраны и стимулировать биологическую активность клеток. Они также представляют интерес как естественные антиоксиданты и консерванты пищи, так как они безопасны по сравнению с синтетическими пищевыми добавками (1). Куркума Curcuma longa L. - одна из основных специй, принадлежащих к семейству имбирных (Zingiberaceae), используемых для улучшения цвета, аромата и вкуса пищи в большинстве регионов Южной Азии. Известно, что куркума широко используется в аюрведе, китайской медицине и традиционном бытовом лечении. Эфирное масло куркумы извлекается из корневища растения методом паровой дистилляции. Свободные радикалы образуются в организме в результате избыточного производства активных форм кислорода, вызванных воздействием внешних окислительных веществ или из-за недостаточного функционирования защитных механизмов. Они способствуют возникновению ряда заболеваний и состояний, в том числе артрита, геморрагического шока, сердечных болезней, старения, болезни Паркинсона, бокового амиотрофического склероза, расстройств иммунитета, язвы желудка, воспаления, катаракты и рака. Можно уменьшить риск хронических заболеваний и предотвратить прогрессирование заболевания путем повышения естественной антиоксидантной защиты организма или добавления антиоксидантов в пищу. Масло куркумы состоит из уникального набора сесквитерпеноидов, которые обладают значительной фармакологической активностью. Есть данные о противогрибковой, репеллентной, антибактериальной, антимутагенной и антиканцерогенной активности куркумы (2-4). Настоящее исследование направлено на оценку антиоксидантных и противовоспалительных свойств масла куркумы.

Материалы и методы

Для того чтобы получить однородную суспензию эфирного масла куркумы, приготовленного с помощью паровой дистилляции для исследований in vitro, масло растворяли в гексане в концентрации 1 мг/мл и добавляли 10 мкл детергента Triton X100, далее выпаривали досуха и разбавляли 10 мл дистиллированной воды. Для перорального введения масло куркумы растворяли в вазелиновом масле.

В работе были использованы белые мыши линии Swiss и мыши Balb/C массой 20-25 г. Они размещались в хорошо проветриваемых клетках в контролируемых условиях света и влажности и получали обычный корм и воду без ограничений. Все эксперименты на животных проводились в соответствии с инструкциями, предписанными Комитетом по контролю и надзору за экспериментами в отношении животных, Министерством окружающей среды и лесов Индии, правительством Индии и осуществлялись через Комитет по этической этике животных.

В работе использовали декстран, каррагинан, нитротетразолий синий (NBT), глутатион, окисленный глутатион, восстановленный никотинамидадениндинуклео тидфосфат (НАДФ), 5-5'-дитиобис-2-ниотробензойную кислоту, 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH), 2,2-азобис-3-этилбензтиозолин-6-сульфоновую кислоту (ABTS), форбол-12-миристат-13-ацетат (PMA) и другие химические реактивы и реагенты аналитической чистоты.

Хромато-масс-спектрометрический анализ

Куркумовое масло подвергали хромато-масс-спектрометрическому анализу (GCMS) при помощи газового хроматографа, соединенного с квадрупольным масс-спектрометром и использовали капиллярную колонку (5% фенилметилсилоксана; 30×320×0,25 Um). Температуры интерфазы, ионного источника и селективного масс-детектора составляли 243°C, 230°C и 150°C соответственно. В качестве газа-носителя использовали гелий при скорости потока 1,4 мл / мин. Для масла куркумы температура печи была линейно запрограммирована на 60°C, а затем увеличена с 60°C до 243°C со скоростью 3°C / мин.

Определение антиоксидантной активности эфирного масла in vitro
Антиоксидантную активность эфирного масла in vitro оценивали различными методами. Активность поглощения супероксид-радикалов определяли методом восстановления NBT (5). Активность поглощения гидроксильных радикалов измеряли путем изучения конкуренции между дезоксирибозой и тестируемым соединением для гидроксильных радикалов, образованных системой Fe3+/аскорбат/ЭДТА/Н2О2 (6). Процент ингибирования перекисного окисления липидов определяли путем сравнения результатов испытуемого соединения с результатами контроля. Определение активности DPFH-радикалов проводили с помощью метода Aquino и др. (7). Активность куркумового масла по очищению радикалов ABTS определялась по методике феррил-миоглобин/ABTS (8). Снижение уровня антиоксидантной способности ферросодержащих соединений измеряли при низком рН (9). Величины выражали в виде миллимолей образующегося хлорида железа (III).

Антиоксидантное действие эфирного масла на образование перекисных радикалов форбол-12-миристат-13-ацетатом in vivo
Антиоксидантное действие in vivo изучали путем ингибиции образования перекисных радикалов макрофагами мышей, активированными PMA. Самки мышей Balb/C получали в течение 5 дней масло куркумы в различных концентрациях (10, 50 и 250 мг/кг массы тела). Перитонеальные макрофаги, стимулированные 5% казеинатом натрия, активировали на пятый день инъекцией PMA (100 нг/животное внутрибрюшинно). Через 3 часа макрофаги собирали и оценивали образование перекисных радикалов (10).

Определение влияния эфирного масла на уровни антиоксидантных ферментов in vivo
Самки мышей Balb / C (4-6 недель) весом от 20 до 25 г разделили на четыре группы по пять животных и давали им в течение 30 дней перорально масло куркумы, растворенное в вазелиновом масле в разных дозах.

Группа I: интактные
Группа II: контрольные животные, получавшие только вазелиновое масло
Группа III: животные, получавшие 100 мг масла куркумы / кг массы тела
Группа IV: животные, получавшие 500 мг масла куркумы / кг

Животные были выведены из эксперимента через 30 дней, затем получали образцы крови и тканей печени. Последние промывали в охлажденном льдом буфере TrisHCl (0,1 М, pH 7,4). Цитозольные образцы гомогената печени получали центрифугированием при 10 000 об/мин в течение 30 минут при 4°С.

Общий белок оценивали по методу Lowry и др. (11). Гемоглобин оценивали цианметгемоглобином с использованием метода Drabkin (12). Для определения супероксиддисмутазы методом редукции NBT (5) использовали цельную кровь. Уровень каталазы оценивали, измеряя скорость разложения перекиси водорода при 240 нм (13), а концентрацию глутатиона определяли по методу Морона и др. (14). Сыворотку использовали для оценки глутатионредуктазы по методу Racker (15). В гомогенате печени определяли активность супероксиддисмутазы, каталазы, глутатиона и глутатионредуктазы, как было указано выше, а также активность глутатионпероксидазы, основанной на деградации H2O2 в присутствии GSH с пониженным содержанием глутатиона (16). Глутатион-S-трансферазу (GST) измеряли по скорости увеличения образования конъюгата между GSH и 1-хлор-2,4-нитробензолом (17).

Модель острого воспаления, вызванного каррагинаном
Самки мышей Balb / C были разделены на пять групп, состоящих из шести животных в каждой группе. Мышам группы I (контрольной) вводили только каррагинан, в группе II применяли эталонный препарат диклофенак (10 мг/кг). Животные в группах III, IV и V получали эфирное масло куркумы в различных концентрациях (100, 500 и 1000 мг/кг массы тела) внутрибрюшинно один раз в сутки в течение 5 дней. Через час после пятой инъекции индуцировали острое воспаление в задней лапе мышей путем инъекции в подошвенную подушечку 0,02 мл свежеприготовленной 0,1% суспензии каррагинана в физиологическом растворе (18). Толщину конечности измеряли штангенциркулем каждый час в течение шести часов и через 24 часа.

Модель острого воспаления, вызванного декстраном
Самки мышей Balb / C были разделены на пять групп, состоящих из шести животных в каждой группе. Мышам группы I (контрольной) вводили только декстран, в группе II применяли эталонный препарат диклофенак (10 мг/кг). Животные в группах III, IV и V получали эфирное масло куркумы в различных концентрациях (100, 500 и 1000 мг/кг массы тела) внутрибрюшинно один раз в сутки в течение 5 дней. Через час после пятой инъекции индуцировали острое воспаление путем инъекции в подошвенную подушечку 1% свежеприготовленной суспензии декстрана в 0,1% карбоксиметилцеллюлозе (19). Толщину конечности измеряли штангенциркулем каждый час в течение шести часов и через 24 часа.

Модель хронического воспаления, вызванного формалином
Самки мышей Balb / C были разделены на пять групп. Группа I была контрольной, а на животных группы II воздействовали эталонным препаратом диклофенаком (10 мг/кг). Животные в группах III, IV и V получали эфирное масло куркумы в различных концентрациях (100, 500 и 1000 мг/кг массы тела) внутрибрюшинно один раз в сутки в течение 5 дней. На пятый день индуцировали хроническое воспаление путем инъекции в подошвенную подушечку правой задней лапы 0,02 мл свежеприготовленного 2% формалина (20). Толщину конечности измеряли штангенциркулем 6 дней подряд после инъекции формалина и через 24 часа.

Статистический анализ
Данные, полученные в контрольных и экспериментальных группах, сравнивали путем однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим тестом множественного сравнения Даннетта при уровне значимости p<0,05. Все значения представлены как среднее±стандартная ошибка среднего.

Результаты

Состав куркумового масла

Компоненты масла, определенные с помощью GCMS, представлены в таблице 1. Основным ингредиентом куркумового масла были ар-турмерон (61.79%), курлон (12.48%) и ар-куркумен (6.11%).

Таблица 1. Химический состав куркумового масла



Антиоксидантная активность эфирного масла из специй in vitro

Было обнаружено, что куркумовое масло поглощает супероксидные и гидроксильные радикалы и ингибирует перекисное окисление липидов в тканях. Концентрация масла куркумы, необходимая для 50% поглощения (IC50) перекисных радикалов, составляла 135 мкг/мл, а гидроксильных радикалов - 200 мкг/мл. IC50 для ингибирования перекисного окисления липидов составляла 400 мкг/мл. Было обнаружено, что активность по восстановлению ионов железа на 50 мкг масла составляет 5 мМ. Куркумовое масло также обладало умеренной способностью к поглощению радикалов DPPH, при этом IC50 составляла более 1000 мкг/мл, а также умеренной способностью к поглощению радикалов ABTS.



Рисунок 1. Способность куркумового масла к поглощению свободных радикалов in vitro. (a) Поглощение перекисных радикалов. (b) Поглощение гидроксильных радикалов. (c) Торможение перекисного окисления липидов. (d) Поглощение радикалов DPPH. (e) Поглощение радикалов ABTS. По горизонтальной оси – мкг/мл, по вертикальной оси – ингибирование в процентах.

Влияние масла куркумы на образование супероксидных радикалов, индуцированное форбол-12-миристат-13-ацетатом
Было установлено, что перекисные радикалы, образующиеся при активации PMA в макрофагах, индуцируемых казеинатом натрия invivo, поглощаются маслом куркумы. Процент ингибирования составлял 22,86%, 18,25% и 14,17% для дозировок 250, 50 и 10 мг/кг массы, соответственно.

Влияние введения масла куркумы на антиоксидантные ферменты и глутатион
Концентрации антиоксидантных ферментов в крови и сыворотке мышей увеличивались после введения масла куркумы в концентрациях 100 и 500 мг/кг массы тела в течение 30 дней (таблица 2).

Таблица 2. Влияние перорального введения куркумового масла на антиоксидантные системы крови



Заголовки столбцов: Вид воздействия; Каталаза (килоединиц активности/г гемоглобина);
Супероксиддисмутаза (единицы активности/г гемоглобина); Глутатионредуктаза (единицы активности/г гемоглобина); Глутатион (нмоль/мл). Заголовки строк: Норма (интактные); Контроль; 100 мг/кг веса; 500 мг/кг веса. Нижняя строка: Каждое значение – среднее арифметическое на 5 мышей ± стандартная ошибка среднего. * - достигнутый уровень значимости P<0,05, ** - P<0,01, *** - P<0,001 по сравнению с контролем. ↑ - возрастание процентного значения; a - вазелиновое масло.

Нами обнаружено, что уровень каталазы увеличивается у всех животных, получавших 100 и 500 мг/кг массы тела (P <0,05) куркумового масла (P <0,05). После введения куркумового масла в обеих концентрациях значимо повысился уровень супероксиддисмутазы (P <0,001). Было также установлено, что во всех обработанных группах повысился уровень глютатиона, причем достоверно - под воздействием масла в дозе 100 мг/кг массы тела (P <0,01) и 500 мг/кг массы тела (P <0,001). Концентрация глутатионредуктазы увеличивалась при введении куркумового масла (Р <0,05) у всех животных, получавших его в дозе 100 мг/кг массы тела, наибольшую активность проявляло масло в дозе 500 мг/кг массы тела (Р <0,001).

Куркумовое масло также оказало значительное влияние на антиоксидантные ферменты в ткани печени мышей после воздействия в течение 30 дней (таблица 3).

Таблица 3. Влияние перорального введения куркумового масла на антиоксидантные системы печени



Заголовки столбцов: Вид воздействия; Каталаза (единиц активности/мг белка);
Супероксиддисмутаза (единицы активности/мг белка); Глутатионпероксидаза (единицы активности/мг белка); Глутатион-S-трансфераза (нмоль/мг белка); Глутатионредуктаза; Глутатион (нмоль/мг белка). Заголовки строк: Норма (интактные); Контроль; 100 мг/кг веса; 500 мг/кг веса. Нижняя строка: Каждое значение – среднее арифметическое на 5 мышей ± стандартная ошибка среднего. * - достигнутый уровень значимости P<0,05, *** - P<0,001 по сравнению с контролем. ↑ - возрастание процентного значения; † - нмоль потребляемого НАДФ/мин/мг белка; a - вазелиновое масло.

Уровень каталазы существенно не изменялся ни в одной экспериментальной группе. Активность супероксиддисмутазы усиливалась после воздействия маслом в дозе 500 мг/кг массы тела (P <0,01). Уровень фермента глутатионпероксидазы был повышен после применения масла в дозах 100 и 500 мг/кг массы тела. Несмотря на то, что было обнаружено увеличение концентрации глутатиона, оно не было статистически значимым. Уровень глутатионредуктазы не изменялся во всех экспериментальных группах. Было установлено, что у животных, получавших масло, значительно повышался уровень GST (P <0,001).

Модель острого воспаления, вызванного каррагинаном
Отек конечности в результате острого воспаления, вызванного каррагинаном, значительно снижался на 61,1% по сравнению с контрольной группой через 3 часа у животных, получавших эфирное масло куркумы в дозе 1000 мг/ кг массы тела. При дозах 500 и 100 мг/кг массы тела уменьшение толщины конечности на этом сроке составило соответственно 50% и 33,3% (Рис.2), в группе сравнения (диклофенак, 10 мг/кг) - 55,56%.

Модель острого воспаления, вызванного декстраном
Куркумовое масло в дозе 1000 мг / кг массы тела через 3 часа эксперимента значимо уменьшало толщину лапы на 58,8% по сравнению с контрольной группой (рисунок 2). При дозах 500 и 100 мг / кг массы тела куркумовое масло снижало отечность конечности на 47,1% и 35,3% соответственно, в группе сравнения (диклофенак, 10 мг / кг) - 52,94%.

Модель хронического воспаления, вызванного формалином
Эфирное масло куркумы статистически значимо понижало отечность конечности в моделях острого воспаления (Рис. 2). Отек конечности уменьшался на 34,17% (Р <0,01), 41,67% (Р <0,01) и 50% (Р <0,001) в группах, получавших масло куркумы в дозах 100, 500 и 1000 мг/кг. Процент ингибирования отека был почти такми же, как после воздействия диклофенаком в дозе 10 мг/кг (54,80%).



Рисунок 2. Влияние куркумового масла на отек конечности, вызванный (a) каррагинаном, (b) декстраном, (c) формалином. По горизональной оси – "до воздействия" и временные интервалы (a, b – часы, c - дни), по вертикальной оси – толщина конечности (см). Надписи на графиках – контроль; 1000 мг/кг; 500 мг/кг; 100 мг/кг.

Обсуждение
Хромато-масс-спектрометрический анализ эфирного масла Curcumalonga L. выявил, что основным соединением, присутствующим в эфирном масле, был ар-турмерон, который, вероятно, вносит наибольший вклад в антиоксидантную активность масла куркумы. В литературе имеются сообщения, указывающие на антиоксидантный потенциал куркумового масла invitro (2,4), который может быть обусловлен наличием фенильного кольца и 13-ненасыщенной кетоновой функцией ар-турмерона (21). Антиоксидантную активность эфирного масла специй можно использовать для предотвращения прогоркания пищи. Антиокислительные свойства куркумы могут быть использованы пищевой промышленностью, применяя ее в качестве альтернативы синтетических консервантов пищевых продуктов.

Куркумовое масло проявляло значительную противовоспалительную активность на моделях острого и хронического воспаления. NO, супероксид (O2-) и их продукт реакции пероксинитрит (ONOO-) в избытке образуются в период реакции организма на инфекции и воспалительные состоянияй. В моделях острого воспаления, индуцированных каррагинаном и декстраном, применение куркумового масла уменьшало отек конечности. Ранее было доказано двухфазное действие каррагинана. Первая фаза опосредуется высвобождением гистамина и серотонина в течение первого часа после воздействия и кининов в течение 2,5 ч. Вторая фаза опосредуется высвобождением простагландинов, протеаз и супероксидных радикалов с 2,5 до 6ч (22). Индуцированный декстраном отек конечности является следствием высвобождения гистамина и серотонина из тучных клеток. В настоящем исследовании куркумовое масло дозозависимо ингибировало вторую фазу отека конечности, вызванного каррагенаном, что указывает на ингибирование медиаторов воспаления и поглощение свободных радикалов. Инъекция формальдегида (хроническое воспаление) в конечность мышей вызывало значительное местное воспаление. Отек, вызванный формальдегидом, опосредован ранним высвобождением брадикинина (нейрогенная фаза), за которым следует тканевая реакция, в которую входят высвобождение гистамина, 5-гидрокситриптамина, простагландинов и брадикинина (23). Уменьшение отека конечности с помощью масла куркумы может быть связано с ингибированием действия этих веществ. Многочисленные исследования показали, что возникновение большинства хронических заболеваний, в том числе рака, диабета, сердечно-сосудистых и легочных болезней, связано с хроническим воспалением. Таким образом, подавление хронического воспаления имеет значение для предотвращения и даже лечения различных хронических заболеваний, включая рак.

Есть также данные о том, что масло куркумы обладает болеутоляющим действием после введения уксусной кислоты. Анальгетический эффект уксусной кислоты обусловлен высвобождением медиаторов, таких, как гистамин, серотонин, брадикинин, цитокины и эйкозаноиды (24). Эти факторы способствуют повышению проницаемости сосудов, а также уменьшают порог ноцицепции и стимулируют нервную терминацию ноцицептивных волокон (25). Антиноцицептивная активность масла куркумы связана с торможением высвобождения этих воспалительных медиаторов или с блокированием их рецепторов, что создает местный болеутоляющий эффект. В печени всех животных, получавших куркумовое масло, наблюдалось значительное увеличение активности GST. Поскольку GST участвует в детоксикации канцерогенов, наши результаты показывают, что масло куркумы увеличивает детоксикацию канцерогенов и может снизить заболеваемость раком. Таким образом, помимо придания аромата кулинарным изделиям, эфирные масла также полезны для здоровья, улавливая свободные радикалы, образующиеся в организме и повышая уровни канцерогенных детоксицирующих ферментов.

Наши результаты показывают, что куркумовое масло не только улучшает вкус пищи, но также оказывает положительное влияние на организм, удаляя образующиеся свободные радикалы и таким образом действуя как противовоспалительное средство. Более того, увеличение уровней GST указывает на то, что куркума может усиливать детоксикацию канцерогенов и тем самым действовать как противораковый агент.

Литература

1. Reische DW, Lillard DA, Eitenmiller RR. Antioxidants in food lipids. In: Ahoh CC, Min DB, editors. Chemistry, nutrition and biotechnology. New York: Marcel Dekker; 1998. pp. 423–48.
2. Sacchetti G, Maietti S, Muzzoli M, Scaglianti M, Manfredini S, Radice M, et al. Comparative evaluation of 11 essential oils of different origins as functional antioxidants, antiradicals and antimicrobials in foods. Food Chem. 2005;91:621–32.
3. Negi PS, Jayaprakasha GK, Jaganmohan Rao L, Sakariah KK. Antibacterial activity of turmeric oil: A byproduct from curcumin manufacture. J Agri Food Chem. 1999;47:4297–300.
4. Jayaprakasha GK, Jena BS, Negi PS, Sakariah KK. Evaluation of Antioxidant Activities and Antimutagenicity of Turmeric Oil: A Byproduct from Curcumin Production. Z Naturforsch C. 2002;57:828–35. [PubMed: 12440720]
5. Mc Cord JM, Fridovich I. Superoxide dismutase enzyme function for erythrocaprein. J Biol Chem. 1969;244:6049–55. [PubMed: 5389100]
6. Ohkawa H, Oshishi N, Yagi K. Assay for lipid peroxide in animal tissue by thiobarbituric acid reaction. Anal Biochem. 1979;95:351–8. [PubMed: 36810]
7. Aquino R, Morellis S, Lauro MR, Abdo S, Saija A, Tomaino A. Phenolic constituents and antioxidant activity of an extract of Anthurium vesicular leaves. J Nat Prod. 2001;64:1019–23. [PubMed: 11520218]
8. Alzoreky N, Nakahara N. Antioxidant activity of some edible Yemeni plants evaluated by Ferryl myoglobin / ABTS assay. J Food Sci Technol Res. 2001;7:144–6.
9. Benzie IF, Strain JJ. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of “antioxidant power” - The FRAP assay. Anal Biochem. 1996;239:70–6.[PubMed: 8660627]
10. Dwivedi PD, Verna AS, Ray PK. Induction of immune rejection of tumours by 343 protein A in mice bearing transplantable solid tissue Dalton's lymphoma tumors. ImmunopharmacolImmunotoxicol. 1992;14:105–28.
11. Lowry OH, Rosenbrough NJ, Farr AL, Randall RJ. Protein measurement with the Folinphenol reagent. J Biol Chem. 1951;193:265–75. [PubMed: 14907713]
12. Drabkin DL, Austin M. Spectrometric studies; spectrometric constants for common haemoglobin derivatives in human, dog and rabbit blood. J Biol Chem. 1932;98:719–33.
13. Aebi M. Catalase estimation. In: Berg Meyer HV, editor. Methods of Enzymatic Analysis. New York: Verlag Chemie; 1974. pp. 673–84.
14. Moron MA, Depierre JW, Mannervik B. Levels of glutathione, glutathione reductase and glutathione-S-transferase activities in rat liver. Biochim Biophys Acta. 1979;582:67–8. [PubMed: 760819]
15. Racker E. Glutathionreductase (Liver and yeast) In: Sidney PC, Nathen OK, editors. Method of Enzymology. New York: Academic Press; 1955. pp. 722–5.
16. Hafeman DG, Sundae RA, Houestra WG. Effect of dietary selenium on erythrocyte and liver glutathione peroxidase in the rat. J Nutr. 1974;104:580–7.[PubMed: 4823943]
17. Habig WH, Pabst MJ, Jakoby W B. Glutathione-S-transferase, the first enzymatic step in mercapturic formation. J Biol Chem. 1974;247:7130–9. [PubMed: 4436300]
18. Winter CA, Risly EA, Nuss GW. Carrageenan induced edema in hind paw of the rats as assay for anti inflammatory drugs. Proc Soc Exp Bio Med. 1962;111:544–7.[PubMed: 14001233]
19. Maity TK, Mandal SC, Mukherjee PK. Studies on anti inflammatory effect of Cassia tora leaf extract. (fam. Leguminosae) Phytother Res. 1998;12:221–4.
20. Chau TT. New York: Alan R LissInc; 1989. Analgesic testing in animals models. In Pharmacological methods in the control of inflammations; pp. 448–52.
21. Baik KU, Jung SH, Ahn BZ. Recognition of pharmcophore of ar-turmerone for its anticancer activity. Arch Pharmacal Res. 1993;16:254–6.
22. Di Rosa M, Giroud JP, Willoughby DA. Studies on the mediators of acute inflammatory response induced in rats in different sites of carrageenan and turpentine. J Pathol. 1971;104:15–29. [PubMed: 4398139]
23. Wheeler-Aceto H, Cowan A. Neurogenic and tissue mediated components of formalin-induced edema: Evidence for supraspinal regulation. Agents Actions. 1991;34:264–9. [PubMed: 1665298]
24. Deraedt R, Jougney S, Delevalcee F, Falhout M. Release of prostaglandin E and F in an algogenic reaction and its inhibition. Eur J Pharmacol. 1980;51:17–24.[PubMed: 7353582]
25. Martinez V, Thakur S, Mogil JS, Tache Y, Mayer EA. Differential effects of chemical and mechanical colonic irritation on behavioral pain response to intraperitoneal acetic in mice. Pain. 1999;81:179–86. [PubMed: 10353506]

Опубликовано: Liju V.B., Jeena K., Kuttan R. An evaluation of antioxidant, anti-inflammatory, and antinociceptive activities of essential oil from Curcuma longa. L. Indian J Pharmacol. 2011 Sep-Oct; 43(5): 526–531

Перевод и редактирование: Г.Б.Большакова

Любое копирование ЗАПРЕЩЕНО!